伊诺的依赖和独立的阶段在小鼠淋巴结扩张TNF-induced inflammatory-erosive关节炎gydF4y2Ba

介绍gydF4y2Ba

淋巴管的关键效应(LV)函数在关节内稳态被确认在肿瘤坏死factor-transgenic (TNF-Tg)小鼠模型的类风湿性关节炎(RA)。具体地说,LV收缩与进步的滑膜炎和侵蚀。此外,引流淋巴结扩张是关节炎的进展的生物标志物,巨噬细胞和淋巴内皮细胞表达诱导一氧化氮合酶(间接宾语),从而打乱LV收缩和运输的引流淋巴结免疫细胞。因此,直接评估这些关系,我们测试的假设TNF-Tg老鼠与全球的基因消融伊诺(进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba})将显示延迟引流淋巴结扩张,维护LV收缩,减少滑膜炎和侵蚀。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba

伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg雌性和雄性老鼠,控制同窝出生(进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}、TNF-Tg WT),与(1)超声波检查,以确定腘淋巴结(PLN)体积和(2)近红外成像技术(NIR)评估腘LV收缩频率,和基因型之间的差异是3,4,5,6个月大的时候。膝盖和PLN收获在男性女性的4个月和6个月,评估滑膜炎、骨侵蚀,通过组织学和细胞积累PLN鼻窦。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

最初,观察PLN体积的增加对女性和男性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg和TNF-Tg WT,进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}分别对应2和3个月。随后,TNF-Tg pln继续增加体积,而间接宾语gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg不增加体积从最初的时间点。WT和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}在整个实验中PLN体积不变。LV收缩频率增加男性在女性的4个月和5个月,进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠TNF-Tg相比。滑膜炎和侵蚀在伊诺适度减少gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}在雌性×TNF-Tg与TNF-Tg膝盖,而没有观察到男性膝盖病理的差异。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba

遗传伊诺消融体积保持引流淋巴结和LV功能在TNF-induced炎性关节炎和与适度减少关节炎症和损伤。gydF4y2Ba

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性,衰弱,动关节的炎症性疾病,影响了全世界1.0%的成年人口(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。标志特征包括免疫细胞浸润滑膜伴随着居民呈扩散synoviocytes (FLS的),导致正常的增生的滑膜。由此产生的“滑膜炎”形式推进破坏性组织侵蚀软骨和骨消融(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。在诊所,患者常常表现为影响关节的疼痛和肿胀,在严重的情况下,影响关节功能的逐步丧失。gydF4y2Ba

过程中炎症性关节炎,多余的液体,细胞和大分子产生发炎的关节由滑膜清理的间质淋巴系统(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。重要的是,lymphangion,淋巴收集容器的功能单元,生成语气和内在脉动的收缩,推动流体的进展向淋巴结(LNs)。这些收缩产生的严格控制的级联信号分子来生成所需的语气和随后的收缩之后,放松的船gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。Ca之间的平衡gydF4y2Ba^{2 +gydF4y2Ba}通量缩短肌球蛋白丝和一氧化氮(NO)释放,延长丝调节淋巴流体运动通过一系列的收缩。病理破坏这些收缩事件可能导致体液聚积在慢性炎症。gydF4y2Ba

最近的研究在肿瘤坏死factor-transgenic (TNF-Tg)小鼠模型的类风湿性关节炎表明淋巴系统在关节内稳态的重要作用[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。详细分析联合排水淋巴结显示动态的细胞和体积上的变化,与关节炎的进展(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。这些老鼠显示明显异常LN的体积变化随着时间的推移和淋巴血管的功能。成像的腘淋巴结(PLN)确定一个扩张阶段开始2.5个月的年龄和山峰之间的5和6个月大的时候。连续记录在这个时间框架显示稳定的淋巴管收缩频率、淋巴泵压和CD11b +细胞速度增加而控制鼠标(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。这种扩张阶段,后跟一个暂时随机崩溃阶段经过5个月的年龄,以LN显著减少体积,CD23gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba/ CD21gydF4y2Ba^嗨gydF4y2BaB细胞填充鼻窦,血管收缩和停滞不前的损失CD11b +细胞在船(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。LN体积变化的连续阶段都伴随着滑膜体积的增大。TNF-Tg老鼠与扩大LNs滑膜卷比WT老鼠,以及倒塌LNs的TNF-Tg小鼠最大的滑膜卷。节点的崩溃也伴随着海拔的多普勒信号,测量血流增加的gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。组织学和微型电脑断层扫描分析表明,严重的膝关节滑膜炎和骨质侵蚀不出现,直到PLN崩溃,指示PLN崩溃是严重的膝关节炎的生物标志物(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。重要的是,所有这些对雄性小鼠进行研究,但是当我们研究了雌性老鼠,我们发现显著改变进展表明TNF-Tg小鼠模型,这些淋巴和关节炎表型性别差异(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。雌性老鼠显示早期扩张(~ 4月龄)和峰值崩溃(~ 6月龄)的腘淋巴结相伴与早期滑膜炎和骨质侵蚀(3个月)。这些结果表明,TNF-Tg小鼠模型是理想的上下文中研究淋巴疾病表型性别差异的关节炎和应该考虑疾病的进展。gydF4y2Ba

特别相关的另一个发现的潜在贡献lymphangion在RA淋巴管(lv)进行重大在关节炎的病理变化,最终导致淋巴功能的丧失。众所周知,monocytoid细胞迁移和增殖在滑膜炎性关节炎(gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。活体荧光成像表明,在扩张阶段,CD11b +细胞流远离LV的联合,在倒塌的阶段,他们基本上是固定在船gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。单核细胞和巨噬细胞炎症介质的初级生产者,如TNFα和进气阀打开,分解代谢的因素(例如,矩阵metalloproteases) [gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。因此,stationary-activated lv坚持内巨噬细胞淋巴内皮细胞(lec) permeabilize内皮,肌肉,促进细胞凋亡的淋巴细胞(lmc)、透射电子显微镜(即可见一斑gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。此外,MRSA-induced淋巴肌细胞损失不恢复260天后建议延长缺陷如果LMC报道[恶化gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。证据伊诺在LV的损失函数在关节炎来自研究证明inflammation-induced伊诺lec和恢复的LV收缩后化学抑制伊诺(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。伊诺在肥胖的老鼠也改善淋巴功能,抑制慢性炎性环境(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。总的来说,这些发现表明,慢性炎症诱发LV结构和功能的变化,包括伊诺的生产过剩,抑制关节发炎的LV收缩性和淋巴引流。LN明显下降函数可能引发体积崩溃的排水LN和诱发关节炎恶化gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。因此,在这项研究中,我们审查的前提下全球伊诺基因消融将推迟或阻止排水LN扩张,保持LV收缩,减轻滑膜炎的严重程度和侵蚀因子在鼠RA模型。gydF4y2Ba

动物gydF4y2Ba

目前的工作是进行事先批准的罗切斯特大学医学中心大学委员会动物资源。3647年肿瘤坏死factor-transgenic鼠标线最初来自乔治博士Kollias [gydF4y2Ba19gydF4y2Ba,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba),维护为杂合子,跨多个代一直保持。伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}老鼠从杰克逊实验室(应变:B6.129P2 -gydF4y2BaNos2gydF4y2Ba^{tm1LaugydF4y2Ba}/ J)和交叉着TNF-Tg小鼠获得伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-TggydF4y2Ba^{+ /−gydF4y2Ba}。所有的研究进行同窝出生仔畜野生型或间接宾语gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}控制。由于观察时间不同的男性和女性TNF-Tg病理学(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba),雄性和雌性动物在不同年龄与疾病表型进行了研究。纵向分析(超声和近红外淋巴成像)在雌性老鼠执行2、3和4个月的年龄和在雄性老鼠3,4,5,6个月。老鼠随后安乐死,收获和组织进行组织学分析。gydF4y2Ba

超声波gydF4y2Ba

b型和能量多普勒超声成像进行VisualSonics Vevo3100使用MX700探针(FUIJIFILM,多伦多,加拿大)在左右PLN。LN卷和归一化能量多普勒(PD)信号收集如前所述[gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。简单地说,老鼠与1 - 3%异氟烷麻醉,脱毛霜从下肢应用于去除头发,和老鼠克制麻醉热床上保持在37°C。脚垫是贴在电极测量心脏和呼吸速率。b型和能量多普勒(PD)图像得到呼吸之间,以避免运动工件。多普勒参数如下:频率、40 MHz;权力,100%;脉冲重复频率1.5千赫;门,6;多普勒,34分贝;32 dB的增益; depth, 10 mm; width, 5.73 mm; bean angle, 0°; sensitivity, 5; and line density, high. B-mode and PD image stacks were imported to Amira (ThermoFisher Scientific, Hillsboro, OR, USA), and the LN was segmented using the B-mode images to obtain lymph node volumes. PD signal within the LN segment was then quantified and normalized to total LN volume (NPDV).

近红外淋巴成像gydF4y2Ba

如前所述(执行近红外成像gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。短暂,老鼠与1 - 3%异氟烷麻醉,脱毛霜是用来把头发从下肢热床上然后维持麻醉在37°C。10毫升100μg /毫升吲哚菁绿注入左和右脚垫,和脚被限制在45°角身体腘淋巴管形象化。近红外图像捕获在一个定制的系统40分钟后注入为了吲哚菁绿(ICG)来填补淋巴管,回到稳态间质压力后应用程序的组织压力抑制后肢增加间隙压力改变淋巴收缩性(gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。图像记录在10分钟和导入图像感兴趣的区域(ROI)分析J。ROI是贴在淋巴管和丸染料穿过它随着时间的推移,随着时间的推移产生协调小组强度图。淋巴管收缩频率计算得分高峰和低谷的图表(由RDB)。gydF4y2Ba

组织学gydF4y2Ba

终端端点(4个月大的雌性和6个月大的雄性),腘淋巴结和膝盖在neutral-buffered福尔马林固定石蜡包埋组织学和加工。膝盖和脚踝的矢状部分,和一个部分从内侧间室与苏木精和伊红染色(H和E)和tartrate-resistant酸性磷酸酶(陷阱),我们之前的描述(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。B220-PE抗体被用来染色pln的B细胞。所有幻灯片都扫描一个奥林巴斯VS120(全滑动扫描可用的要求),并执行histomorphometry产生的数字图像。淋巴结总面积、窦区、鼻窦内和细胞面积以及滑膜总面积和滑膜细胞区域与Visiopharm量化(Hoersholm、丹麦)使用一个应用程序改编自前文所述的H和E肺分析(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

统计数据gydF4y2Ba

所有统计分析JMP Pro 13 (SAS、杜伦、数控)。所有连续变量进行了分析通过Shapiro-Wilk测试正常。结果,不是正态分布,一个秩变换之前进行进一步分析。纵向变量的混合模型重量,PLN体积,NPDV,收缩频率具有重复结构被用来评估的不同组合之间的交互因素(年龄、TNF-Tg存在和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}存在)在适当的时候。当重大的三方互动影响观察,图基的事后测试进行调查具体的差异。当没有观察到显著的交互效应,自定义的对比gydF4y2BatgydF4y2Ba测试执行TNF-Tg小鼠和没有功能之间伊诺基因在每个计算调整后的α水平为0.016占三个比较。单向方差分析来评估PLN组织学上的差异。Wilcoxon标志等级测试用来测试膝盖组织学参数。gydF4y2Ba

伊诺的依赖和独立阶段联合排水淋巴结扩张期间inflammatory-erosive关节炎gydF4y2Ba

以前,我们发现显著减肥TNF-Tg小鼠inflammatory-erosive关节炎(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。评估伊诺这种表型的贡献,随着时间的推移我们测量全身重量,发现女性TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg小鼠明显类似的减少重量在3和4个月的年龄相比WT,进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。然后,我们调查了PLN卷,发现TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg小鼠显著类似PLN体积增加2个月大的时候。然而,在3和4个月的年龄,TNF-Tg PLN量继续增加,而体积在伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠持平后2个月大的时候(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Bab)。令人惊讶的是,NPDV,血流量的测量,没有组随着时间的推移(图之间的不同。gydF4y2Ba1gydF4y2Bac)。在雄性老鼠,进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}没有明显改变TNF-Tg老鼠的体重(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Bad)。此外,男性TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠增加了PLN体积相比各自控制在2个月大的时候,虽然TNF-Tg PLN继续扩大体积随着时间的推移,但伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg PLN没有(图。gydF4y2Ba1gydF4y2Bae)。有趣的是,没有观察到NPDV差异(图gydF4y2Ba1gydF4y2Baf)。值得注意的是,NPDV个体变异的女性和男性都TNF-Tg老鼠(图。gydF4y2Ba1gydF4y2Bac、f)是大,它可能会影响这个数据集的统计分析。gydF4y2Ba

鉴于前面描述的两性异形的LNs TNF-Tg鼠标线(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba),我们调查了女性和男性之间的关系进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg PLN体积。因为男性和女性TNF-Tg老鼠证明疾病进展时间的差异,我们分析了高峰时期PLN卷TNF-Tg老鼠(雌性小鼠的4个月和5个月的雄性老鼠)。重要的是,没有区别男性和女性的进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}或间接宾语gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠在高峰LN疾病(M±SD:女性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}0.33±0.09 vs男性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}0.21±。02和女性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}1.79±0.87×TNF-Tg vs男性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg 1.59±0.82毫米gydF4y2Ba^3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

理解LV功能在整个inflammatory-erosive关节炎,和进气阀打开的效果gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}表型,我们进行近红外光谱在雄性和雌性小鼠淋巴成像(无花果。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。近红外光谱成像显示增加腘LV收缩在4个月大的雌性伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠相比TNF-Tg老鼠(图。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在雄性老鼠)。TNF-Tg小鼠在5个月收缩频率明显下降,而大多数伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠保持收缩频率。这种关系在6个月时消失,进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠显示收缩频率比伊诺的丧失gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}老鼠。gydF4y2Ba

在以前的工作中,我们描述了B细胞的大量流入排水LN从滤泡面积及其迁移到LN鼻窦[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。驴如果伊诺扮演一个角色在LN表型上面所描述的那样,我们从女性和男性PLN组织学评估小鼠(分别为4和6个月)。扩大LN鼻窦TNF-Tg和伊诺指出gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg雌性老鼠,值得注意的是,更多的细胞相比,出现在他们的鼻窦WT老鼠(图。gydF4y2Ba3gydF4y2Baa e)。有趣的是,我们发现没有区别在鼻窦内的细胞积累PLN TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠(图。gydF4y2Ba3gydF4y2BaE)。TNF-Tg伊诺在雄性老鼠的损失也没有影响的多孔性PLN鼻窦(图。gydF4y2Ba3gydF4y2Baf j)。评估潜在伊诺影响B细胞TNF-Tg PLN内的老鼠,我们为B细胞进行免疫组织化学TNF-Tg和进气阀打开,没有观察到显著的差异gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg pln(无花果。gydF4y2Ba4gydF4y2BaA、B)。然而,大量B220 +细胞中观察到伊诺gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg PLN鼻窦,我们得出这样的结论:伊诺可能调节B细胞的迁移到鼻窦。gydF4y2Ba

遗传伊诺消融保护雌性老鼠从TNF-induced滑膜炎而不影响破骨细胞的形成gydF4y2Ba

伊诺消融的影响评估TNF-induced inflammatory-erosive关节炎,我们从4对膝盖进行histomorphometry女性和6个月大的男性TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg老鼠。Histomorphometry血管翳组织呈现出下降的趋势,与免疫细胞明显减少集群在伊诺滑膜炎gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg TNF-Tg相比女性膝盖(图。gydF4y2Ba5gydF4y2Baf)。然而,没有观察到对滑膜炎伊诺影响雄性老鼠(无花果。gydF4y2Ba5gydF4y2Bag-l)。破骨细胞形成评估的存在陷阱+染色,有趣的是,女性的膝盖的陷阱染色显示没有区别在软骨下陷阱+区域空间,髁的表面,或髌骨和弯月面区域(无花果。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba)。因此,伊诺选择性保护TNF-induced滑膜炎在雌性老鼠,在不影响破骨细胞的形成。gydF4y2Ba

伊诺在类风湿性关节炎的机械的影响是非常具有挑战性的阐明由于效和对比的功能没有在体内平衡的维护和其他设置,促进炎症。虽然最初的报道伊诺抑制在急性关节炎的动物模型是有前途的gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba),选择性伊诺抑制剂在早期RA患者的临床试验没能证明显著的功效[gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。然而,鉴于其潜在改变LV功能紊乱在RA,我们研究了遗传伊诺消融排水LNs的角色,LV收缩,和关节炎与inflammatory-erosive TNF-Tg小鼠关节炎。有趣的是,在这里,我们确定了小说的两个阶段联合排水LN动力学、早期伊诺独立阶段和随后的伊诺依赖阶段。这些阶段是守恒的两性(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Bab, e)和不相关细胞分布在PLN潜在终端时间点(图。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

以前,我们实验室确定不同的阶段TNF-Tg PLN体积的老鼠与离散阶段膝关节炎(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。在疾病的早期阶段,pln经历3 - 6×WT的体积增大,这与早期关节炎有关。随后,LN随机崩溃通过一个未知的机制,一个事件与晚期关节炎有关。巨噬细胞和伊诺产生淋巴内皮细胞,在LV淋巴泵送压力的损失,建议淋巴管收缩的失调可能影响LN表型,因此,调制伊诺生产可能改变疾病表型(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。重要的是,我们发现基因伊诺消融改变这个PLN表型(无花果。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),但淋巴收缩变化发生在不同的时间点(图。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)提出独立的机制。这些对比发现可能与已知伊诺影响收缩的PLN独立的扩张阶段,而血管收缩性和淋巴压力可能控制崩溃阶段,我们的研究设计进行调查。符合这个解释LN扩张的报告在一个免疫模型依赖于c型凝集素2 (CLEC-2)表达树突状细胞(dc) [gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。CLEC-2 null DCs过继转移到辐照时,免疫小鼠,更少的迁徙DCs排水LN的观察。DCs的低数量也减少重排和扩大的成纤维细胞的网状网络(复用),如发现CLEC-2抑制podoplanin (PDPN)依赖FRN的收缩性。此外,伊诺消融减少直流扩张和可能发挥作用在LN大小TNF-Tg模型(gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

这个预防LN扩张,但是,不一定是有益的TNF-Tg小鼠关节炎疾病的结果。我们的组织学结果显示中度衰减的关节炎雌性小鼠的表型和没有改变在雄性小鼠的表型。未能达到一个健壮的减少关节炎可能是由多种因素来解释。首先,炎性关节炎的表现型TNF-Tg老鼠在很大程度上是non-antigen驱动(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。因此,任何变更在抗原呈递细胞出口为LN不得改变抗原独立炎性反应发生在TNF-Tg老鼠。第二,没有和伊诺扮演关键角色在破骨细胞和成骨细胞(OB) (OC)活动gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2Ba]。伊诺是负的破骨细胞形成的监管机构,可以诱导成骨细胞增殖。抑制伊诺实际上可能增加骨质流失一些煽动性的设置。OC和OB效应将独立于免疫细胞出口运输联合通过淋巴引流淋巴结。最后,伊诺依赖关节炎衰减可能发生在特定的时间点不捕获在这项研究中,特别是在雄性老鼠。男性可能会影响手术在早期的时间点,和肿瘤坏死因子的基因诱导生产过剩可能压倒任何潜在的好处的时候我们终端的计算。gydF4y2Ba

B细胞堆积在毛囊和鼻窦也被证明是重要的在扩大和崩溃TNF-Tg LNs [gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。这些细胞经过调查,我们对H和执行histomorphometry E-stained LNs。有趣的是,我们发现没有区别在细胞数量的鼻窦内TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg LN,表明在这些时间点,B细胞易位可能不会在LN扩张中发挥作用。进一步,当我们定性分析B220-stained LNs, TNF-Tg和伊诺之间没有显著差异gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg LNs。gydF4y2Ba

我们研究设计有限宽度的结论,因为我们利用一锅基因消融伊诺和cell-targeted方法可能阐明特定细胞伊诺对TNF-induced关节炎的影响。这是特别重要的在理解伊诺的作用在血管系统没有一个强有力的血管舒张,和伊诺被发现在RA患者和增加水平已经与血管内皮功能障碍(gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。进一步,伊诺的主动脉胶原诱导关节炎的老鼠,暗示伊诺的角色在关节炎小鼠模型(血管系统gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。最后,有一个小但WT统计差异和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}LN体积在基线分析TNF-Tg独立的。然而,没有差别在TNF-Tg和进气阀打开gydF4y2Ba^{−−/gydF4y2Ba}×TNF-Tg LN体积最早设置的时间点表明炎症,有一个进气阀打开独立阶段的扩张。gydF4y2Ba

总之,我们发现伊诺LN扩张的独立和依赖的阶段inflammatory-erosive关节炎模型。这些数据表明伊诺可能发挥作用在LN反应在关节炎的进展。gydF4y2Ba

和/或使用的数据集分析在当前研究可从相应的作者以合理的要求。gydF4y2Ba

CPM:gydF4y2Ba

每分钟宫缩gydF4y2Ba

读者:gydF4y2Ba

呈synoviocytesgydF4y2Ba

协调小组:gydF4y2Ba

吲哚菁绿gydF4y2Ba

伊诺:gydF4y2Ba

诱导一氧化氮合酶gydF4y2Ba

LNs:gydF4y2Ba

淋巴结gydF4y2Ba

LV:gydF4y2Ba

淋巴管gydF4y2Ba

近红外光谱:gydF4y2Ba

近红外成像gydF4y2Ba

没有:gydF4y2Ba

一氧化氮gydF4y2Ba

NPDV:gydF4y2Ba

归一化能量多普勒体积gydF4y2Ba

帕金森病:gydF4y2Ba

能量多普勒gydF4y2Ba

PLN:gydF4y2Ba

腘淋巴结gydF4y2Ba

类风湿性关节炎:gydF4y2Ba

类风湿性关节炎gydF4y2Ba

投资回报:gydF4y2Ba

感兴趣的区域gydF4y2Ba

TNF-Tg:gydF4y2Ba

肿瘤坏死factor-transgenicgydF4y2Ba

WT:gydF4y2Ba

野生型gydF4y2Ba

作者还想承认凯西Maltby,莎拉•麦克杰夫·福克斯在组织学、生物化学、分子成像(HBMI)在罗切斯特大学医学中心的核心专业技术和组织学表现。作者要感谢罗恩·伍德博士为他的专长在近红外成像。gydF4y2Ba

这个工作是由国家卫生研究院/ NIAMS T32 AR053459, NIH / NIAMS P30 AR069655, NIH / NIAMS R01 AR56702, NIH / NIAMS AR063650。gydF4y2Ba

作者和联系gydF4y2Ba

1. 肌肉骨骼研究中心,罗切斯特大学医学中心,榆木大街601号,665箱,罗切斯特,纽约,14642年,美国gydF4y2Ba

   理查德·d·贝尔Pamelia n . Slattery艾米丽·k·吴,坤兴,克里斯托弗·t·Ritchlin &爱德华·m·施瓦兹gydF4y2Ba

2. 病理学和实验室医学系,罗彻斯特大学医学院和牙科,罗彻斯特,纽约,美国gydF4y2Ba

   理查德·d·贝尔坤兴&爱德华·m·施瓦兹gydF4y2Ba

3. 生物学系,罗彻斯特大学医学院和牙科,罗切斯特,纽约,美国gydF4y2Ba

   Pamelia n SlatterygydF4y2Ba

4. 微生物学与免疫学、罗彻斯特大学医学院和牙科,罗切斯特,纽约,美国gydF4y2Ba

   艾米丽·k·吴&爱德华·m·施瓦兹gydF4y2Ba

5. 过敏、免疫学、风湿病、医学、罗彻斯特大学医学院和牙科,罗切斯特,纽约,美国gydF4y2Ba

   克里斯托弗·t·RitchlingydF4y2Ba

6. 罗彻斯特大学医学院整形外科学系和牙科,罗切斯特,纽约,美国gydF4y2Ba

   爱德华·m·施瓦兹gydF4y2Ba

贡献gydF4y2Ba

RDB参与的设计研究中,进行了实验和统计分析,起草了手稿。pn协助开展实验和手稿的准备。LX和CTR参与研究设计和起草的手稿。EMS研究的构思;参与设计;提供了空间,材料,研究和资金;和辅助数据的解释和手稿准备。所有作者阅读和批准最终的手稿。gydF4y2Ba

相应的作者gydF4y2Ba

对应到gydF4y2Ba爱德华·m·施瓦兹gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

伦理批准和同意参与gydF4y2Ba

目前的工作是进行事先批准的罗切斯特大学医学中心大学委员会动物资源。gydF4y2Ba

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不适用。gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

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卡塔尔世界杯常规比赛时间施普林格自然保持中立在发表关于司法主权地图和所属机构。gydF4y2Ba

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